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动物基因组编辑已经成为了在动物体行、位点特异的基因修饰的一个常用技术,具有重要的科学研究价值。本书系统介绍了传统的动物基因打靶技术、动物基因组编辑新技术、动物基因组编辑相关技术、动物基因组编辑的应用等内容。
目录章 动物基因组编辑技术的衍展 1节 利用基因打靶技术制备基因工程动物的基本流程 2一、插入型载体(O型载体) 2二、置换型载体(Ω型载体) 2节 影响中靶效率的因素 3一、同源臂的同源及长度 3二、载体导入的方法 4三、靶基因位点 4四、转染时细胞和细胞周期的选择 4第三节 传统基因打靶技术 4一、Cre/loxP重组酶系统 5二、FLP/FRT重组酶系统 6三、ФC31重组酶系统 8第四节 基因打靶的应用 10一、基能研究 10二、动物疾病模型与基因 10三、家畜育种 11参考文献 12章 基因组编辑新技术 16引言 16节 ZFN技术 16一、ZFN技术原理及制备方法 18二、ZFN技术研展 23三、ZFN技术前景 24参考文献 34节 TALEN技术 35一、TALEN技术原理及制备方法 36二、TALEN 研展 40三、TALEN技术前景 42参考文献 53第三节 CRISPR/Cas9基因组编辑技术 55一、CRISPR/Cas系统简介 55二、CRISPR/Cas9基因组编辑技术的原理能及特点 60三、CRISPR/Cas9基因组编辑系统的构建方法 、CRISPR/Cas9基因组编辑技术的应用 66五、CRISPR/Cas9技术前景展望 70参考文献 章 动物基因组编辑相关技术 76节 显微注射技术 76一、原核显微注射技术制备基因工程猪技术路线 77二、原核显微注射法制备基因工程动物的研展 83参考文献 86节 体细胞核移植技术 87一、体细胞核移植技术简介 88二、体细胞克隆的主要方法及流程 89三、猪的胚胎移植手术操作 95四、体细胞克隆技术目前存在的问题 100五、体细胞克隆技术的前景展望 101参考文献 102第三节 RNA干扰技术 105一、RNAi现象的发现 105二、RNAi的作用机制 105三、RNAi的生物学特点 107四、影响RNAi效率的因素 107五、RNAi的应用 108六、RNAi技术应用中存在的问题 109参考文献 110第四节 病毒载体技术 111一、慢病毒载体 112二、腺病毒载体 113三、腺相关病毒载体 115四、单纯疱疹病毒载体 116参考文献 117第五节 人工染色体技术 118一、酵母人工染色体 118二、细菌人工染色体 119三、人类人工染色体 119四、人工染色体的应用 120参考文献 121第六节 转座子 122一、转座子的定义 122二、转座子类型 123三、DNA转座子家族 123四、PB转座子结构及转座机制 125五、SB转座子研展 125六、Tol2转座子结构及转座机制 128七、转座子的应用 129参考文献 132第七节 精子介导的基因转移技术 135一、精子载体法的发展 135二、精子载体法的机制 135三、精子载体法的应用 13、精子载体法应用中存在的问题 137参考文献 137第八节 复合状基因工程动物制备技术 138一、复合状基因工程技术及其发展 138二、复合状基因工程技术的应用 140参考文献 140案例一:基于MSTN基因座的转IGF-1基因猪 141案例二:可控表达GH基因工程猪 144第四章 基因组编辑动物的评价与检测 153节 基因组编辑动物的生物评价 153一、基因组编辑动物的生物评价原则 154二、基因组编辑动物的生物风险分析 155三、基因组编辑动物的生物管理办法 160参考文献 163节 基因组编辑动物的分子技术 164一、核酸的检测 164二、蛋白质的检测 16、分子特征检测新方法 173参考文献 175第五章 基因组编辑动物的应用 178节 研究基能,建立动物模型 178节 在疾病中的应用 181一、杜氏肌营养不良 182二、帕金森病 182三、血友病 183四、β-地中海贫血症 184五、遗传酪氨酸血症 184六、镰状细胞贫血 184七、X 连锁的严重联合免疫缺陷病 185八、X 连锁的慢肉芽肿病 1、大疱表皮松解症 186十、α1-抗胰蛋白酶缺陷症 186十一、遗传白内障 187十二、囊纤维化 18、传染疾病 187十四、 190第三节 基因组编辑技术在生物制药中的应用 192第四节 基因组编辑技术在产中的应用 192第五节 基因组编辑技术存在的潜在问题 196一、技术问题 196二、生态和生物问题 19、伦理问题 197第六节 展望 198参考文献 198索引 205
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