病原生物学与医学免疫学实验+2

内容简介

本教材全书分为常用仪器使用、基本实验、综合实验和创新实验四篇，附录有常用培养基、指示剂、缓冲液的制备和文后彩图。本教材突出综合实验及创新实验，独立成编；利用病原生物学实验室自有的标本制作了大量插图，由于文中有大量插图，使用者更加容易学握病原体的形态结构；本教材内容完整，层次清晰，便于学生提前预加适合创新人才的培养。 《病原生物学与医学免疫学实验》适合我国高等医学院校5年制、长学制学生使用，也可供研究生参考使用。

目录

篇 常用仪器使用章 实验室规则章 常用仪器的使用和维护篇 基本实验第三章 医学微生物学基本实验实验一 细菌的形态与结构观察实验二 细菌的培养及生长现象观察实验三 外界因素对细菌的影响实验四 常见病原细菌的分离鉴定方法实验五 厌氧芽孢梭菌属与需氧芽孢杆菌实验六 白喉杆菌与结核杆菌实验七 衣原体、支原体、立克次体、螺旋体、放线菌的形态观察实验八 真菌培养及形态结构观察实验九 病毒的形态实验十 病毒的分离培养实验十一 病毒血凝和病毒血凝试验第四章 医学寄生虫学基本实验实验一 线虫实验二 吸虫实验三 绦虫实验四 叶足虫实验五 鞭毛虫实验六 孢子虫实验七 医学节肢动物第五章 医学免疫学基本实验实验一 凝集反应实验二 沉淀反应实验三 免疫细能的检测实验四 豚鼠过敏试验实验五 免疫标记技术第三篇 综合实验第六章 综合实验项目……第四篇 创新实验附录彩图

摘要与插图

篇

基本实验

医学微生物学基本宴骗

实验一细菌的形态与结构观察

微生物学是一门形态学科。各种细菌在环境条件下，有相对恒定的形态与结构，

了解细菌的形态与结构是鉴别细菌的重要方法之一。细菌涂片的制备、染色及形态观察在

微生物学实验过程中是一个重要的基本环节。

【实验目的】

pan style="font-family:宋体">．观察常见细菌的基本形态和一些细菌的特殊结构。

2．掌握革兰染色的原理和操作方法。

3．熟悉悬滴法并观察细菌的运动能力。

一、观察细菌的基本形态与特殊结构

【实验原理】．

细菌的基本形态分为球菌、杆菌和螺形菌。球菌为圆形或椭圆形．,--盲径．约v pan style="font-family:宋体">“m，各种球孽的排列方式有不同类型；杆菌为直杆状，各种杆菌的大小和形态有很大差异；壕形菌是菌体有弯曲的细菌，菌体有一个弯曲呈逗号状的为弧菌，有多个弯曲的为螺菌。

细菌的特殊结括荚膜、鞭毛、菌毛和芽孢。其中荚膜、鞭毛和芽孢通过特殊的染色方法可在光学显微镜下观察，而菌毛太微小，只能在电子显微镜下观察。荚膜为菌体外的尊液物质，不易着色，革兰染色后为透明不着色区，荚膜染色为淡紫色；鞭毛为细长丝状筝构，需通过鞭毛染色法使鞭毛变粗后才能在显微镜下观察到；芽孢用革兰染色亦不易着色i通常显示为透明圆形或椭圆形结构，如用芽孢染色法则染出的芽孢呈红色，菌体呈蓝色。

【实验器材】。

!·示教玻片葡萄球菌、链球菌、脑膜炎奈瑟菌、大肠埃希菌、破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、霍乱弧菌、变形杆菌(鞭毛染色)、肺炎链球菌(荚膜染色)。

2．其他显微镜。

【实验方法】

显微镜油镜下观察以上细菌示教玻片。

【实验结果】

pan style="font-family:宋体">·葡萄球菌镜下呈圆形，革兰染色阳，葡萄串样或散在排列，无芽孢无荚膜(彩图pan style="font-family:宋体">。

2．链球菌镜下呈圆形或椭圆形，革兰染色阳，长链或短链状排列，无芽孢无荚膜(彩图2)。

3．肺炎链球菌镜下为矛头似圆形，革兰染色阳，两两排列，宽端相对，向外，可见荚膜(彩图3)。

4．脑膜炎奈瑟菌镜似肾形或豆形，革兰染色阴，两两排列，形似咖啡豆，无芽孢无荚膜。

5．大肠埃希菌镜下呈杆状，为中等大小的杆菌，革兰染色阴，散在排列，无芽孢无荚膜(彩图6)。

6．破伤风梭菌镜下为杆状，革兰染色阳，散在排列，可见芽孢，位于菌体末端，粗于菌体，细菌呈鼓槌状(彩图7)。

7．产气荚膜梭菌镜下呈杆状，为革兰染色阳粗大杆菌，散在排列，可见荚膜(彩图8)。

8．霍乱弧菌镜下呈弧形，革兰染色阴，散在排列，无芽孢无荚膜(彩图5)。

9．变形杆菌镜下呈杆状，散在排列，可见细长的鞭毛，鞭毛遍布菌体，菌体和鞭毛均为红色(彩图12)。

【注意事项】

pan style="font-family:宋体">．芽孢有时可脱离菌体．成为一个透明空泡状结构。

2．有荚膜的细菌菌体有时可从荚膜中脱离出来，剩余的荚膜呈不着色的区域。

3．鞭毛可从菌体上脱落，呈游离的丝状结构。

4．细菌的形态结构经常受到外界环境的干扰而出现不典型的形态，不同菌龄的细菌其形态也会有差异。观察时应注意鉴别。

【思考题】

观察细菌镜下形态时应注意观察哪些特征?

二、革兰染色法

【实验原理】

革兰染色法是细菌学上常用的鉴别染色法，可将所有细菌区分为革兰阳菌和革兰阴菌两大类。主要步骤是先用结晶行初染，再加媒染剂碘液，以增加染料和细胞的亲和力．使结晶紫和碘在细胞膜上形成相对分子量较大的复合物，然后再用脱色剂乙醇脱色。后用苯酚(石炭酸)复红复染。凡细菌不被脱色而保留初染剂的颜色者为革兰阳菌。如被脱色后又染上复染剂的颜色者则为革兰阴菌。

革兰染色法的原理主要有三种学说括等电点学说、化学学说与生物学说。其中生物学说认为，两种细菌染色的差异是由于这两类菌的细胞壁结构和成分不同所决定的。阴菌细胞壁的肽聚糖层较薄，主要成分是脂质外膜，容易被乙醇溶解。故乙醇脱色质增加了细胞壁的通透，使结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果是细菌脱色，再经苯酚复红复染后染成了红色。阳菌肽聚糖层较厚，脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小。通透降低，因此细菌仍保留初染的颜色。革兰染色可帮助鉴别细菌，了解细菌的致病和指导临床选用。......