植物显微技术+2

内容简介

《植物显微技术》是据编30年的教学、科研积累及实验技能整理而成。主要介绍了植物显微技术中广泛应用和实用的内容与方法括：植物制片技术（石蜡切片、半薄切片、冰冻切片、切片、冰冻切片、扫描电镜样品制备、木材切片）、原位杂交、原位PCR、植物组织化学、GUS及荧光检测方法、细胞组织分离制片、整体透明技术、胚囊酶法分离技术、整片技术，显微镜的结构、原理、使用和保养，显微测量，专用显微技术（荧光显微术、相差显微术、偏光显微术、微分干涉显微术、暗视野显微术），以及摄影装置和显微摄影技术（微距摄影、体视显微镜摄影、显微摄影）。《植物显微技术》图文并茂，既论述了实验方法与原理，又突出了实验技术要点，并附有详尽相关实验指导，便于教学安排及自学查阅。

目录

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第…篇植物制片技术第…章植物制片的目的和方法概述; 第…节植物制片的目的、类型和;;; 方法………………………2; 节植物制片的…般流程……3;;; …、…般制片的步骤……………4;;; 二、石蜡制片的主要步骤…………4;;; 三，半薄切片的主要步骤…………5; 第三节常用仪器、用具、药品;;; …、常用仪器……………………5;;; 二、常用实验用具………………6;;; 三，常用文具……………………6;;; 四、药品及染料的规格; …………6; 第四节制片前的准备工作……-…7;;; …、玻璃器皿的清洁……………7;;; 二、实验计划、制片日程表………8章石蜡制片法……………………9; 第…节材料的选择与分割………9;;; …、取样…………………………9;;; 二、植物器官的分割……………10;;; 二三、染色片取样………………11; 节同定与保存……-…-…11;;; …、固定的原理和方法…………-12;;; 二、固定液……………………13;;; 三、固定操作步骤………………1 5;;; 四、材料的冲洗…………………1 5;;; 五、同定时需要注意的问题……1 6;;; 六、常用器具………………-…17; 第三节脱水……………………1 7; …、脱水的目的…………………18; 二、常用的脱水剂及脱水与复水;;; 方法………………………18; 三、脱水时注意事项……………18第四节透明……………………1 9; …、透明的目的…………………19; 二、常用的透明剂; ……………19; 三、透明的方法…………………19第五节浸蜡……………………20; …、浸蜡的目的…………………20; 二、浸蜡方法和步骤……………20第六埋…………………21;;; 三、展片、粘片方法及注意事项…30; 第九节脱蜡与透明…………。…30;;; …、脱蜡与透明…………………30;;; 二，石蜡制片中常用的脱蜡剂与透;;; 明剂………………………’31;;; 三、脱蜡方法…………………31; 第十节染料与染色……………31;;; …、染色的目的……………’……31;;; 二、染料的分类…………………31;;; 三、几种常用染料的质及配制;;; ……．．……………………32;;; 四、染色原理简介………………36;;; 五、…般的染色方法……………36;;; 六、染色注意事项……………’’37; 第十…节封藏…………………39;;; …、封藏的目的; ……………’’39;;; =、封藏剂种类; ………-…………39;;; 三、封藏方法………………’“39第三章石蜡制片实例………………40;;; …、根尖纵切片制片法…………40;;; 二、茎的纵、横切片制片法……41;;; 三、叶横切片制片法…………’。’43;;; 四、花芽纵切片制片法…’…………44;;; 五、子房纵切片制片法…………45;;; 六、花生子叶横切片制片法……47;;; 七、线粒片法——雷加特氏法章其他切片法; 第…节徒手切片法……………49;;; …、徒手切片概述………………49;;; 切片实例………………49; 节冰冻切片法……………50;;; …、冰冻切片概述………………50;;; 二、冰冻切片机…………………50;;; 三、冰冻切片方法………………51;;; 四、冰冻切片注意事项…………51; 第三节滑走切片法……………51;;; …、滑走切片法概述……………51;;; 二、滑走切片机组成与使用……52;;; 三、滑走切片法研究木材结构注意;;; 事项………………………52;;; 四、滑走切片实例………………54第五章非切片制片法………………56;;; 第…节压片、涂片制片法……56;;; …、压片、涂片制片方法及在植物;;; 学研究中的应用……………56;;; 二、压片制片法…………………56;;; 三、涂片制片法………………。58;;; 节整片法……………59;;; …、整体透明法……………’……60;;; 二、蚕豆叶或鸭跖叶表皮制片…62;;; 三、小麦叶表皮制片……………62;;; 四、棉胚乳整片……………63;;; 第三节离析法…………………64;;; …、木材解离制片…………………64;;; 二、胚囊酶法分离技术·………-65第六章; 半薄切片、切片与扫描电;;; 镜样品制备…………………67;;; 第…节半薄切片和切片法常;;; 用试剂………………”67;;; …、几种常用同定液的配制……67;;; 二、脱水荆……………………69;;; 三、渗透剂……………………69;;; 四埋剂……………………69;;; 五、常用染料…………………71;;; 节半薄切片制样方法……73;;; …、半薄切片方法简介…………73;;; 二、半薄切片制样步骤…………73;;; 三、半薄切片法在植物学研究中的;;; 应用…………………………77;;; 第三节切片制样方法……78;;; …，切片制样步骤…………79;;; 二、切片法在植物学研究中的;;; 应用……………’………。。84;;; 第四节; 扫描电子显微镜样品的;;; 制备……………………85;;; …、整体样品表面结构观察的制样;;; 方法………………………85;;; …、扫描电子显微镜制样中的关键;;; 步骤…………………………86;;; 三、扫描电子显微镜在植物学研究;;; 中的应用…………………89;;; 第五节冷冻切片制样方法简;;; 介……………………90;;; …、冷冻切片原理…………90;;; 二、冷冻切片方法…………90;;; 三、低埋技术………………9Z;;; 四、冷冻切片在植物学研究中;;; 的应用……………………94第七章原位杂交与组织化学………95; 第…节原位杂交技术……………95;;; …，植物染色体原位杂交技术; …95;;; 二、RNA原位杂交技术………100; 节组织切片原位PcR…104;;; …、原位PcR技术的基本原理…104篇; 显微镜与显微摄影技术第八章显微镜………………………¨4; 第…节显微镜基本知识………¨4;;; …、显微镜的种类……………114;;; 二、透镜成像的基本知识’’……。115;;; 三、光路简介…………………116;;; 四、复式显微镜结构原理………11 6;;; 五、显微镜的参数……………11 7; 节显微镜的结构和能;;; …………………………1 20;;; …、光学系统………………。’1 20;;; 二、机械部件-……………’…123;;; 三、器和显微测微尺………1 25;;; 四、显微镜的保养……………’127;;; 五、显徽镜的维护……………1 28; 第三节几种常用显微镜简介;;; ．．．………………………131;;; …、复式显微镜的原理、结构与使;;; 用; ………………………1 31;;; 二、体视显微镜的原理、结构与使;;; 用; ………………………135;;; 三、荧光显微镜的原理、结构与使;;; 用; ………-……………141;;; 四、倒置显微镜的原理、结构与使;;; 用; ………………………’147;;; 五、激光共聚焦显微镜简介……1 50;;; 六，电子显微镜的原理、结构与使;;; 用; ………………………150;;; 第四节几种显微技术的应用; 二，基本类型……………’………104; 三、原位PcR基本步骤………105第三节植物组织化学…………106; …、核酸的测定………………106; 二、细胞内含物的测定; ………107; 二三、细胞壁物质的测定; ………109第四节GUs及荧光检测……110; …、GUs组织化学染色………110; 二、免疫组织化学检测; ………111; 三、非免疫荧光标记…’………111;;; …、荧光显微术………………’157;;; 二、相差显微术………。……。’159;;; 三、微分干涉术………………。161;;; 四、偏光显微术………………164;;; 五、暗视野显微术·…………’’1 66第九章显微摄影成像装置…………1 68;;; 第…节摄影和照相机的发展历史;;; …………………………1 68;;; …、摄影术的含义和发明………168;;; 二、照相机的发明和发展·……。; 169;;; 节; 照相机的类型和结构;;; …………………………170;;; …、照相机的类型……………170;;; 二、照相机的主要结构; ………1 72;;; 第三节照相机的使用方法……174;;; …、曝光和曝光量……………174;;; 二、调焦……’’…………………1，5;;; 三、控制景深…………………176;;; 四、控制清晰度………………176;;; 五、数码相机简介-…………’’1 77;;; 六、CCD相机简介……………。183第十章显微摄影技术………………184;;; 第…节显微摄影技术概论……184;;; …、图像采集…………………184;;; 二、图像存储…………………184;;; 三、图像处理…………………185

; …埋剂……………………21; 二、石蜡的种类; ………………21; 兰、石蜡的选择…………………22; 四、各级石蜡的配制埋前的;;; 准备……………………22; 五埋方法…………………-23第七节切片……………………24; …、切片机、切片刀种类及应用;;; ……………………………25; 二、切片机的组成与使用………25; 三、切片刀的准备……………26; 四、蜡块的分割、修整与固着; …27; 五、切片方法与步骤·……………27; 六、石蜡切片过程易出现的问题及;;; 解决的办法…………………27第八节展片与粘片……………28; …、展片、粘片; ………………28; 二、常用粘贴剂及其配制………29

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摘要与插图

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章; 植物制片的目的和方法概述

制片技术是植物显微技术课程的一个重要组成部分。它是从事植物生物技术、植物细胞学、结构植物学、植物生殖生物学、植物发育生物学等研究的必要技术基础。在植物营养器官和生殖器官的形态发生、作物遗传育种、分子鉴定、作物与病原菌互作、资源植物(含)的鉴定和利用、林木材鉴定等多方面的研究和教学工作中，都需要应用植物制片技术。由于各种植物器官的质有差异以及研究目的不同，需要不同的制片方法。制片技术在生物科学领域内占有重要的地位，已成为生物学工作者常用的一门实验技术年来随能基因组学、分子生物学研究的不断深入，需要揭示基因在植物体的表达部位及在特定发育时期的作用，这需要植物显微技术与分子生物学技术结合。本章根据常用的植物制片基本原理及教学中行之有效的方法加以介绍。

节植物制片的目的、类型和方法

植物制片的目的：因为植物体较大且不透明，不能直接在显微镜下观察。要研究植物体的内部结构，要经过特殊的处理，使材料减少厚度及体积，使光线透过样品才行显微观察。处理后的材料要求小而薄、完整、透明、保持原结构，又具有颜色容易辨认。要达到上述要求。需要采取不同的制片方法。

植物制片技术很多，其中有些是不同技术的组合，如石蜡切片与化学或者生化技术结合形成组织化学技术、与免疫技术结合形成免疫组织化学技术、与分子生物学技术结合形成原位杂交技术、与计算机技术结合形成组织结构的三维重建技术等。因此，植物制片技术是生物学研究中不可缺少的重要内容。不论制片技术如何发展，对于初学者来说，熟练掌握制片的基本技术是必要的，在此基础上举一反三，为学实验技术打下基础……